背景介紹

    污染物之間的毒性效應(yīng)往往具有加和、協(xié)同、拮抗等作用，常規(guī)理化參數(shù)監(jiān)測項目單一，難以評估。通過生物綜合毒性檢測能監(jiān)測未被檢測的污染物的潛在的毒性效應(yīng)，可以有效反應(yīng)污染物對人體健康、環(huán)境生態(tài)系統(tǒng)的綜合影響。因此，在供水安全、預(yù)警突發(fā)環(huán)境污染事件場景和公共衛(wèi)生事件中，生物毒性在水質(zhì)安全保衛(wèi)中發(fā)揮著重要的作用。

    急性毒性檢測根據(jù)選取受試生物不同，分為魚類急性毒性測試法、浮游生物急性毒性測試法和微生物急性毒性測試法。前 2 種方法工作量大，測試時間長，不適于大批量水樣的快速檢測，發(fā)光細(xì)菌法因其檢測速度快、自動化程度高、人為錯誤少等優(yōu)點得到廣泛應(yīng)用。早在 20世紀(jì) 70 年代末，國外科學(xué)家就已從海魚體表分離出了發(fā)光細(xì)菌用于檢測水體的生物毒性，90年代德國與歐盟均頒布了應(yīng)用發(fā)光細(xì)菌檢測水質(zhì)急性毒性的標(biāo)準(zhǔn)方法，而我國于 1995 年頒布實施了《水質(zhì) 急性毒性的測定 發(fā)光細(xì)菌法》（GB/T15441-1995），現(xiàn)該法已成為我國水質(zhì)急性毒性快速檢測的常用方法。通過建立污染水體作用劑量與毒性效應(yīng)之間的關(guān)系，可以將損害程度量化，直觀地反映污染水體對生物種群的影響，提供環(huán)境污染預(yù)警，更好地指導(dǎo)環(huán)境污染防治。因而水質(zhì)急性毒性檢測已經(jīng)逐步成為評價水質(zhì)污染地重要手段之一。

    浙江省某環(huán)監(jiān)站擔(dān)任著省內(nèi)環(huán)境安全和保證供水系統(tǒng)安全的重任，需要對水質(zhì)綜合毒性指標(biāo)能進(jìn)行快速檢測的能力，經(jīng)過與國家標(biāo)準(zhǔn)方法的對比，認(rèn)為 TX1315 便攜式生物毒性分析儀可以勝任毒性檢測的需求，并且可以針對突發(fā)事故進(jìn)行現(xiàn)場檢測。

實驗操作

• 復(fù)蘇菌
  a. 1mL 冷的 2.5% NaCl 加入到凍干粉中；
  b. 冰箱中復(fù)蘇 30 分鐘。

• 配置測試樣品
  a. Hg 標(biāo)液 1000mg/L 稀釋到 20mg/L；
  b. Hg 標(biāo)液 20mg/L 稀釋到 2mg/L；
  c. Hg 標(biāo)液 2mg/L 稀釋到測試用不同梯度濃度。

• 測試
  a. 加樣：2mL Hg 標(biāo)液/2mL 3% NaCl+ 10ul 發(fā)光菌液；
  b. 反應(yīng) 15 分鐘；
  c. 每個濃度三個平行樣，每個測試管配一個參考管。

檢測結(jié)果

根據(jù)《水質(zhì) 急性毒性的測定 發(fā)光細(xì)菌法》（GB/T15441-1995）標(biāo)準(zhǔn)要求，使用明亮發(fā)光桿菌作為受試菌種，檢測汞的不同當(dāng)量濃度標(biāo)準(zhǔn)液的 RLU 值和相對發(fā)光度，結(jié)果如下圖所示。

總結(jié)

• 發(fā)光細(xì)菌法測定水質(zhì)急性毒性可選用參比毒物來表征，也可選用抑制率來表示。我國國標(biāo)中采用HgCl?作為參比毒物，在檢測樣品的同時，制作一系列濃度的HgCl?與發(fā)光強(qiáng)度關(guān)系曲線。以樣品的相對發(fā)光強(qiáng)度從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)的HgCl?濃度，則該樣品的毒性即相當(dāng)于該濃度HgCl?的毒性。

• 發(fā)光細(xì)菌發(fā)能較好的反映水質(zhì)的綜合毒性，但是不能獲得具體某一類型毒性物質(zhì)的毒性信息。

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